增強型ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒

簡要描述：產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBproExtra® 增強型ECL試劑盒采用高品質(zhì)進口原料，經(jīng)大量樣本實驗驗證優(yōu)化配方。穩(wěn)定性高，檢測方便，可檢測pg級的抗原。

產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2024-11-23
訪問量：176

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產(chǎn)品分類

CLASSIFICATION

蛋白質(zhì)生物學(xué)

蛋白提取和裂解細(xì)胞器分離蛋白純化蛋白質(zhì)濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學(xué) 查看全部產(chǎn)品

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詳細(xì)介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項

1.長期不用-20℃儲存。
2.試劑拆封后請盡快使用完！

有效期

一年

儀器準(zhǔn)備

1.移液器
2.冰箱
3.冰盒

試劑準(zhǔn)備

純水

耗材準(zhǔn)備

1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套

使用注意事項

1.ECL工作液配制過程中吸取試劑A和試劑B時務(wù)必跟換吸頭，工作液新鮮配制后立即使用，放置過久會影響靈敏度。
2.根據(jù)蛋白豐度不同曝光時間可能是數(shù)秒至數(shù)小時。
3.曝光時間過長會使背景加深，曝光不足會導(dǎo)致條帶模糊。
4.如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL發(fā)光和曝光。
5.必須使用高質(zhì)量保鮮膜。

使用方法

1. 使用合適的方法進行 Western，直至用PBST洗滌二抗。
2. 配制新鮮ECL工作液：試劑A和試劑B按1:1混合均勻后即為ECL工作液。
3. 印跡膜蛋白面朝上，用ECL工作液均勻滴加至印跡膜使其覆蓋。ECL工作液使用量大約為0.125ml/cm2膜或根據(jù)個人實驗習(xí)慣使用。
4. 用平頭鑷夾住印跡膜，垂直置于吸水紙以吸去自然流下的多余工作液，注意不能讓膜干掉。
5. 快速將印跡膜置于二層保鮮膜之間，盡量趕盡氣泡。
6. 將印跡膜蛋白面朝上，放于X光膠片暗盒內(nèi)。（如果用顯像儀器直接置于儀器中拍照即可）
7. 在暗室內(nèi)放入X光片，曝光，顯影。如果在暗室中可肉眼看到比較亮的條帶，建議曝光1分鐘-3分鐘；如果肉眼看到的帶比較淡，建議曝光3-10分鐘；如果很淡或基本看不到帶，建議曝光10分鐘-30分鐘。

常見問題分析

1.為什么會發(fā)生光淬滅？
抗原濃度太高，局部過多的HRP會快速消耗底物，導(dǎo)致光信號過強，條帶呈灼燒樣。可降低抗原上樣量。
操作時間過長，膜逐漸干掉。避免膜干掉。
不良的實驗習(xí)慣導(dǎo)致設(shè)備或試劑污染。例如鐵銹和不慎沾染的顯影液、定影液，會造成光淬滅，甚至直接導(dǎo)致無熒光。

參考文獻

1.Ouyang Chen, Zhouheng Ye et al.
Methane attenuates myocardial ischemia injury in rats through anti-oxidative, anti-apoptotic and anti-inflammatory actions
Free Radical Biology and Medicine 2016 （IF=5.784）

2.Guoming Zhang, Song Gao et al.
Pharmacological Postconditioning with Lactic Acid and Hydrogen Rich Saline Alleviates Myocardial Reperfusion Injury in Rats
Scientific reports 2015 （IF=5.228）

3.Hao Liua, Anmin Chena et al.
A short-hairpin RNA targeting osteopontin downregulates MMP-2 and MMP-9 expressions in prostate cancer PC-3 cells
Cancer Letters 2010 Volume 295, Issue 1, Pages 27-37 （IF=6.508）

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