RIPA裂解液（不含triton x-100）

簡(jiǎn)要描述：產(chǎn)品概述 product description 貝博RIPA裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制，對(duì)動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用，是經(jīng)典常用的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等下游實(shí)驗(yàn)。本RIPA裂解液成分為25mM Tris?HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS。根據(jù)相應(yīng)實(shí)驗(yàn)要求添加自己需要的蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑。

產(chǎn)品型號(hào)：
廠(chǎng)商性質(zhì)：生產(chǎn)廠(chǎng)家
更新時(shí)間：2025-01-01
訪(fǎng) 問(wèn) 量：83

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產(chǎn)品分類(lèi)

CLASSIFICATION

蛋白質(zhì)生物學(xué)

蛋白提取和裂解細(xì)胞器分離蛋白純化蛋白質(zhì)濃縮和緩沖液置換蛋白定量蛋白凝膠電泳免疫組織化學(xué) 查看全部產(chǎn)品

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詳細(xì)介紹

保存溫度

2-8℃

注意事項(xiàng)

1.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

有效期

1年

檢測(cè)方法

WB、IP等

適用樣本

細(xì)胞、組織

產(chǎn)品應(yīng)用

WB、IP等

儀器準(zhǔn)備

1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機(jī)/勻漿器

試劑準(zhǔn)備

1.PBS緩沖液（pH7.4，實(shí)驗(yàn)室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X））（phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量試劑盒

耗材準(zhǔn)備

? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套

使用注意事項(xiàng)

1.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。
2.整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫狀態(tài)。
3.本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
4.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
5.禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
6.使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并清除殘留清潔劑。
7.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

使用方法

A．細(xì)胞裂解
1. 取5-10×106個(gè)細(xì)胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。
2. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
3. 每5×106個(gè)細(xì)胞中加入500ul冷的裂解液（每106個(gè)細(xì)胞，大約10mg或10ul壓積，加100ul RIPA裂解液。大約相當(dāng)于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一個(gè)75 cm2培養(yǎng)瓶加1 ml。裂解液和細(xì)胞應(yīng)充分接觸。如果RIPA裂解液不足量，細(xì)胞裂解效率將會(huì)降低），混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
4. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
5. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，用于下游實(shí)驗(yàn)。

B．組織裂解
1. 取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無(wú)明顯肉眼可見(jiàn)固體。
2. 將組織勻漿吸入另一預(yù)冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
3. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，用于下游實(shí)驗(yàn)。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br>

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